3讨论

　　目前，用于家兔超数排卵的激素组合，主要是FSH+hCG和PMSG+hCG，在激素的使用剂量方面，不同实验差别较大，所获结果也不尽相同. 刘亚等［5］研究发现，FSH+hCG方案优于PMSG+hCG，故我们采用FSH+hCG方案进行家兔超数排卵. 实验结果显示，FSH 25 U组及FSH 80 U+PVP组的超排效果明显优于FSH 15 U组及对照组. 可能是由于超排剂量过低时, 不足以引起较多卵泡成熟所致. 对经产兔和青年兔的超排处理显示，兔龄对超排效果的影响十分明显，激素组内经产兔排卵数显著高于青年兔,这与以往的研究结论一致［6,7］. 至于青年兔超排效果低于经产兔的原因尚不完全清楚,可能与青年母兔生殖机能发育不完善, 卵巢上的生长卵泡较少,发育不好所致；也可能是所采用的方案不适合青年母兔.

　　在使用FSH进行超排时，由于其半衰期短，仅为2~5 h，需分次连续注射，应用较为烦琐. PVP为一种大分子化合物，对FSH具有包被和缓释的作用，将FSH溶解于PVP中，可延长其在动物体内的半衰期，减少注射次数，应用较为简便. 从本实验结果可以看出，FSH 80 U+250 g/L PVP组与FSH 25 U组的排卵总数和可用卵数无统计学差异，而高于FSH 15 U组及对照组（P＜0.05）. 所以，完全可以将PVP应用于家兔的超数排卵.

　　作为卵母细胞激活的中间调节物，细胞内游离Ca2+浓度变化在卵母细胞受精激活及人工活化过程中起重要作用［8］. 电脉冲刺激可使细胞膜上产生可逆的微孔，细胞外Ca2+内流，使胞质内Ca2+浓度升高，从而激活卵母细胞. 电脉冲引起的微孔大小与脉冲强度、时间、溶液中Ca2+浓度有关. 研究表明，卵母细胞在施以多次电脉冲时可模仿其受精时的Ca2+波动，从而显著提高卵母细胞的激活率和激活后的发育. 电脉冲强度过大，则造成微孔不可逆，细胞受到损伤导致激活率下降［9］. 从本实验中可以看出，脉冲强度较低时，卵母细胞激活率低，脉冲强度过高，则造成卵母细胞不可逆损伤，激活率与孤雌胚的发育率都将下降. 卵母细胞的激活是细胞核移植的关键技术环节之一，卵母细胞激活和孤雌发育与细胞核移植成功密切相关，因为移核后的卵母细胞的核物质被供体细胞核所代替，移入的核物质的复制等过程完全依赖于卵母细胞的激活，因此卵母细胞激活和孤雌胚发育的研究对于提高细胞核移植的成功率也具有重要的意义和价值.

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